目的基因普通pcr扩增不出来？

各位，我最近做荧光定量PCR，采用的相对定量，直接上手荧光定量，发现内参基因的Ct值稳定在19－21这个范围，但是目的基因Ct值很高30以上有的都超过38了……然后我就想着做一下普通pcr看看，结果如图:最左边marker，然后5个内参基因，5个是目的基因。麻烦大家看一下，后面5个是完全什么都没有，想问一下是什么原因，是引物的问题吗？