我有个问题请教一下提取方面专家:
细胞数量是10^4数量级,每管是500ul左右透明的trizol保存,提取的时候觉得提取的RNA量达不到建库要求(按照每个细胞10pg的RNA量算,10^4级别细胞含的RNA达不到1ug建库起始量),所以将多达12管合并提取。
提取的时候我把trizol转管了,用康为
试剂盒,加氯仿吸上清加等体积70%
乙醇,过柱子提取。检测结果总量达不到100ng。
请教各位朋友,哪里做错了吗?
我知道每一步都有
核酸损失,那是不是因为损失的量达到了2微克,所以提取失败?
有没有很好的解决这种问题的方案呢???