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如何改进HepG2 细胞培养条件?

现在养HepG2细胞,养的状态非常差,刚买回来第一次传代很好,第二次传代就很多没贴壁的,瓶底有一层残渣,不动,培养基颜色也没变,细胞也没死,养了十多天细胞长得不满,但开始有飘起来的,然后传代,细胞还是很多没贴壁的,但也有贴壁的,还是底部有残渣。我用的是DMEM高糖培养基+丙酮酸钠+非必须氨基酸+10%血清(进口胎牛血清,一千三四一瓶,牌子为Clark)。麻烦帮忙看一下有什么问题吗?该怎么改进?  


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感觉是消化的问题,是否消化过头 
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