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有没有构建过表达磷酸化ERK1/2的质粒?

请问各位高手,有没有构建过表达磷酸化ERK1/2的质粒?
因为我所要验证的通路是对ERK1/2磷酸化的抑制作用,必须要一个能够过表达磷酸化ERK1/2的质粒进行干预,请问能否构建这样的质粒? 

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共3个回答
不知道你用的细胞体系是什么样的,是否已知表达某种受体?一般来说,用大部分受体的激动剂都可以激活下游的ERK信号。或者用foskolin, PMA等蛋白激酶的激活剂也能达到这个效果。 
磷酸化在ERK1/2质粒不能构建,因为磷酸化蛋白在修饰,这在基因水平上是不能体现的。考虑下别在方法,通路激动剂等,不过也要考虑细胞毒性在问题。 
表达磷酸化ERK1/2的质粒倒是没听说过,但是ERK1/2的质粒应该是有的。我们曾经构建过akt的强制表达质粒。为何要表达呢?可以采用一定的刺激因子使磷酸化ERK1/2表达升高,再用你的因素处理即可,这样不就省事了吗? 
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