最常用的固相载体（膜）主要是硝酸纤维素（NC）膜和聚偏二氟乙烯（PVDF）膜。硝酸纤维素（NC）膜与蛋白质之间靠疏水作用结合，无需预先活化，对蛋白质的活性影响小；非特异性本底显色浅；价格低廉，使用方便。但结合在NC 上的小分子蛋白质在洗涤时易丢失；NC韧性较差，易损坏。聚偏二氟乙烯(PVDF)膜与蛋白质亲和力高，用前需在甲醇中浸泡，以活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电荷蛋白结合。根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的NC膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通常用0.45 μm 和0.2 μm 两种规格的NC 膜。大于20 KD 的蛋白可用0.45 μm 的膜，小于20 KD 的蛋白就要用0.2 μm 的膜。PVDF膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高，非常适合于低分子量蛋白的检测。
