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高效液相色谱分析峰消失了?

求助高手,最近在做中药有效成分HPLC含量测定,同样一个样品测第一次时只出了2个峰,测第二次时多出了好几个峰,后面换了根柱子,此类现象又出现了好几次,请问是什么原因啊?能否避免?
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柱压是正常的,用的是药典上的方法乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱测甘草中甘草苷和甘草酸铵的含量,甘草苷出峰以后后面的峰就都不见了,再进一针后面的峰面积都加倍了。按照药典方法测的峰分离度比较好,不知道为什 ... 对照品进样是什么情况?正常吗?可以试试,进一针供试液,再进一针空白。如果空白有峰的话,证明是前一针的残留。方法验证能通过的话,可以不用理会那些杂质。还有,确认供试液是稳定的。别放久了会变坏,
楼主给是信息太少了……先看柱压是不是正常,排除仪器的问题。再看方法是不是合适。什么样的方法做的,等度还是梯度。有可能是样品里杂质多,第一针没有全部出来,在第二针的时候出来了
楼主给是信息太少了……先看柱压是不是正常,排除仪器的问题。再看方法是不是合适。什么样的方法做的,等度还是梯度。有可能是样品里杂质多,第一针没有全部出来,在第二针的时候出来了 柱压是正常的,用的是药典上的方法乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱测甘草中甘草苷和甘草酸铵的含量,甘草苷出峰以后后面的峰就都不见了,再进一针后面的峰面积都加倍了。按照药典方法测的峰分离度比较好,不知道为什么会出现这种现象?
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