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如何清除细胞中的"黑胶虫"污染? 1

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细胞培养中常见的细胞污染物"黑胶虫"及其分解复合物,对细胞生长和实验结果产生负面影响。目前,许多细胞都存在"黑胶虫"污染现象,这给细胞培养和后续实验带来了很大的困扰。"黑胶虫"污染的细胞具有特征:细胞周围和培养液中有大量的"小黑点",随着培养时间的延长,"小黑点"数量增多,更换培养液或洗涤细胞无法去除;"小黑点"污染的细胞营养消耗快,需要频繁更换培养液;"黑胶虫"污染的细胞生长缓慢,细胞状态差,甚至可能导致细胞形态改变。为了有效清除"黑胶虫"污染,可以使用特殊成分的"黑胶虫"清除基础培养基(RPMI-1640)。

清除方法

1、根据所培养细胞的特性,将"黑胶虫"清除基础培养基(RPMI-1640)配制成相应的完全培养基。

2、将50~100万个细胞铺到60mm的细胞培养皿内,加入4ml"黑胶虫"清除基础培养基(RPMI-1640)孵育细胞,(也可以与细胞正常培养方法相同,直接将"黑胶虫"清除完全培养加入到培养器皿中孵育细胞)。

3、次日更换新鲜的"黑胶虫"清除完全培养基,并更换新的培养器皿;之后每2~3天更换1次培养液,换液时用无菌的平衡盐溶液洗涤细胞1~2次;期间如果细胞密度过大,请保持细胞密度适当(贴壁细胞可能需要用胰酶消化)。

4、使用"黑胶虫"清除培养基3天之后即可见清除效果,连续使用12~14天即可将"黑胶虫"清除,若"黑胶虫"污染较为严重,可延长处理3~5天。

5、为了避免细胞再次受到"黑胶虫"的污染,建议在清除"黑胶虫"后继续使用"黑胶虫"清除培养基,以达到预防的效果。

参考文献

[1]"黑胶虫"清除基础培养基(RPMI-1640)使用说明

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