琼脂糖凝胶的特性及应用领域是什么? ¹

背景及概述^[1]

琼脂糖凝胶是琼脂中的一种重要成分，占据了琼脂的70%。它是一种非硫酸化的链状多聚体，由D-半乳糖和3，6-脱水-L-半乳糖残基交替排列而成。琼脂糖凝胶可以制成柱管或平板状，其中平板状更为常见。它可以用于电泳中分离不同大小或不同构型的核酸分子，并通过溴乙锭在紫外线下显示核酸分子在凝胶中的位置。

琼脂糖凝胶CL-6B是由普通的分子筛填料Sepharose-6B和二溴丙醇或环氧氯丙烷反应而成的。它具有较强的物理和化学稳定性，能够承受较高的柱压。琼脂糖凝胶CL-6B本身是一种惰性物质，但含有大量的β-半乳糖苷键。利用它的这种特性，可以成功地从蛇毒中分离出基于立体专一性的、具有β-半乳糖苷键亲和性的C型凝集素。S型凝集素具有与含β-半乳糖基的糖缀合物结合的特性，在适当的条件下也应能与琼脂糖凝胶CL-6B上的β-半乳糖苷键结合。

应用^[1]

环节动物的S型凝集素在结构和生化性质上与一般的S型凝集素有所不同，具有在抗癌等研究方面的潜在价值。为了纯化蚯蚓S型凝集素，采用了惰性分子筛填料Sepharose CL-6B（琼脂糖凝胶CL-6B）作为亲和色谱介质。通过使用2mmol/L乙二胺四乙酸（EDTA）-MEPBS（4mmol/Lβ-巯基乙醇，150mmol/L NaCl，20mmol/L磷酸盐，pH7.2）溶液作为平衡液，以氨水（150mmol/L，pH10.5）作为洗脱液，成功地分离出纯的蚯蚓S型凝集素。通过SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）、凝血实验和荧光检测等方法证明了纯化物的身份。这种方法只需一个步骤即可从蚯蚓提取液中分离出纯的S型凝集素，比传统方法更加快捷高效，具有明显的优势。该方法的应用将有助于对环节动物S型凝集素的深入研究。

主要参考资料

[1] 琼脂糖凝胶CL-6B亲和色谱法一步纯化蚯蚓半乳凝素