PERCP标记小鼠抗人CD3单克隆抗体的应用及检测原理？ ¹

PERCP标记小鼠抗人CD3单克隆抗体是一种能够特异性结合CD3的单克隆抗体，广泛应用于多种免疫学实验，包括Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。

检测原理：采用双抗体夹心法来测定样本中CD3水平。首先将纯化的CD3抗体包被在微孔板上，形成固相抗体。然后依次加入CD3样品和HRP标记的CD3抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，最终转化成黄色。颜色的深浅与样品中CD3的浓度正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中CD3的浓度。

在免疫学中，CD3是T细胞的重要标志，由不同的链组成，包括CD3γ链、CD3δ链和2个CD3ε链。这些链与TCR和ζ链一起构成T细胞受体复合物，起到传导信号的作用，激活T淋巴细胞。

CD3单克隆抗体与多种细胞因子共同作用下，可以从外周血、骨髓或脐血中分离出具有肿瘤细胞杀伤活性的CIK（Cytokine-induced Killer）细胞。

CD3、CD4、CD8在类风湿性关节炎中的表达及意义研究

通过检测类风湿性关节炎患者滑膜组织中CD3、CD4、CD8的表达及分布情况，探讨它们在类风湿性关节炎发病中的作用。

方法：收集40例类风湿性关节炎患者的手术切除滑膜组织标本，并选取10例骨性关节炎患者的滑膜组织作为对照组。采用免疫组织化学方法，检测RA组和OA组中CD3抗体、CD4抗体、CD8抗体的表达情况。

数据经过SPSS16.0统计软件包分析，计量资料用(x±s)表示，采用配对或独立样本t检验进行数据比较，显著性检验水平设定为0.05。

结果：所有类风湿性关节炎病例的滑膜组织中均有中等量或大量的淋巴细胞浸润，其中92.5%的病例出现淋巴细胞灶性聚集，甚至形成淋巴滤泡样结构。

CD3在类风湿性关节炎滑膜组织中高表达，而在骨性关节炎滑膜组织中低表达。CD3+淋巴细胞的数量在类风湿性关节炎组中显著高于骨性关节炎组，差异具有统计学意义（P<0.05）。

CD4在类风湿性关节炎滑膜组织中高表达，而在骨性关节炎滑膜组织中低表达。CD4+淋巴细胞的数量在类风湿性关节炎组中显著高于骨性关节炎组，差异具有统计学意义（P<0.05）。

CD8在类风湿性关节炎滑膜组织中高表达，而在骨性关节炎滑膜组织中低表达。CD8+淋巴细胞的数量在类风湿性关节炎组中显著高于骨性关节炎组，差异具有统计学意义（P<0.05）。

参考文献

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