RPMI-1640是洛斯维·帕克纪念研究所(Roswell Park Memorial Institute)研发的一种细胞培养基,它最初是为淋巴细胞培养而设计的。现在,它被广泛应用于各种正常细胞和癌细胞的培养,尤其适用于悬浮细胞的培养。RPMI-1640基础培养基含有多种细胞培养所需的氨基酸、维生素和无机盐等成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,因此需要与血清和无血清添加物一起使用。
“黑胶虫”是一种清除RPMI-1640基础培养基成分的方法。
1. 将1升干粉完全溶解于950ml细胞培养级纯净水中。
2. 加入2克碳酸氢钠,继续搅拌至完全溶解。
3. 使用1N盐酸或1N氢氧化钠调整pH,并将溶液体积调至1000ml。
4. 在超净台内使用0.22um滤膜负压过滤。
5. 将培养基在2~8℃避光保存。
1. 将1升高压灭菌型干粉完全溶解于900ml细胞培养级纯净水中。
2. 将溶液pH调至4.0,并将溶液体积调至960ml。
3. 在121℃,15psi高压下消毒5分钟。
4. 迅速取出培养基,避免过久加热引起成分分解或液体蒸发减少。
5. 待培养基冷却至室温后,无菌操作加入29.3ml的无菌7.5%碳酸氢钠溶液,及10ml的无菌200mM L-谷氨酰胺。
6. 如有必要,使用无菌的1N盐酸或1N氢氧化钠调整pH。
7. 将培养基在2~8℃避光保存。
形状:干粉为淡黄色均匀粉末,液体为澄清透明。
溶解:干粉按要求溶解后澄清透明。
pH值:(加碳酸氢钠前)4.4-5.0,(加碳酸氢钠后)7.4-8.0。
渗透压:(加碳酸氢钠前)230-270,(加碳酸氢钠后)280-320。
菌落:干粉每克小于100cfu,液体为无菌。
细胞生长:正常。
[1] Martha M.MooreBarry E.Howard. Quantitation of small colony trifluorothymidine-resistant mutants of L5178Y/TK+/− mouse lymphoma cells in RPMI-1640 medium. Mutation Research Letters. Volume 104, Issues 4–5, May–June 1982, Pages 287-294.
[2] D Peptanariu, Mihaela Zlei, Anca Negur?. Optimization of culture conditions for bone marrow stromal cells in RPMI-1640 medium. Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi. 2012.