在确定双氢青蒿素含量的过程中，准确的测定方法至关重要。本文将探讨不同的测定技术，以确保对该化合物含量的准确评估。
简介：青蒿素（Artemisinin，ART）来源于一年生菊科植物青蒿属，作为一种中药已有2000多年的历史。青蒿素及其衍生物（ARTs）代表了一类新的抗疟药物，对耐药的恶性疟原虫菌株有效，它们在对抗疟疾中发挥重要作用。ARTs已经治愈了100多万疟疾患者，对这一领域做出杰出贡献的屠呦呦获得了多项奖项，其中包括2015年的诺贝尔生理学或医学奖。
1973年，屠呦呦研究小组通过使用硼氢化钠（NaBH4）将青蒿素还原合成了第一代衍生物双氢青蒿素（DHA），其分子式为C15H24O5，分子量为284.35，已被证明是一种低毒、速效的抗疟药物，其结构中的羟基不仅提高了抗疟活性，还可以作为合成一系列抗逆转录病毒药物的切入点。DHA的抗疟效果是青蒿素的10倍以上，并且DHA治疗后的疾病复发率极低，仅有1.95%。自20世纪90年代初DHA在治疗疟疾中取得巨大成功后，屠呦呦团队开始探索DHA的新适应症，并在系统性红斑狼疮的研究中有重要发现，这表明DHA除了抗疟疾作用外，还可能有其他的潜在适应症。据报道，DHA在体外和体内还显示出抗炎、抗寄生虫和免疫调节的特性。越来越多的研究报告发现，DHA在体外和体内对多种类型的癌症具有治疗效果，并可以增强化学治疗、靶向治疗甚至放射治疗的治疗效果。
含量测定：
1. UPLC法
唐红梅等人以青蒿废弃药渣发酵物为实验材料，利用UPLC法同时测定发酵物中青蒿素、双氢青蒿素、青蒿琥酯3个成分的含量。采用岛津Shim-pack XR-ODS II色谱柱(75 mm×2.0 mm i.d.，2.2μm)，以0.1%醋酸溶液：乙腈(50∶50)为流动相，流速0.35 mL/min，检测波长195 nm，柱温30℃，进样量3μL进行检测。结果表明，青蒿药渣发酵物中含有青蒿素、双氢青蒿素、青蒿琥酯3个成分且在15 min内能够完全分离，3个成分分别在5.02～1 004，1.315～263，2.59～518μg/mL范围内线性关系良好，平均加样回收率为分别为99.34%，98.87%，99.46%，RSD为1.91%，1.52%，1.67%，3批药渣发酵物中青蒿素、双氢青蒿素、青蒿琥酯的含量范围分别为543.8～689.3，98.7～152.9，468.7～502.1μg/g。该研究表明利用UPLC法可同时检测青蒿药渣发酵物中青蒿素、双氢青蒿素、青蒿琥酯3个有效成分，为中药材资源再利用创造条件，给青蒿药材及其相关产品的质量控制提供技术支持。
2. HPLC法
周琳等人报道了采用HPLC法测定双氢青蒿素哌喹片中双氢青蒿素的含量方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Waters YMC-Pack ODS-AQ，流动相为乙腈-水(梯度洗脱)，流速为1.0 ml/min，检测波长为216 nm，柱温为30℃，进样量为20μl。双氢青蒿素质量浓度在0.009 6501.930 mg/ml范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤0.5%;平均加样回收率为100.76%，RSD为0.95%(n=9)。该方法准确、简便、快速，可用于双氢青蒿素哌喹片中双氢青蒿素的含量测定。
3. 毛细管电泳法
黄宝美等人使用自行设计的毛细管电泳柱端安培检测系统，在乙醇为有机添加剂的条件测定了双氢青蒿素。结果表明:选用Ag工作电极，检测电位为-0.6V，在20mmol/L硼砂，pH为9的运行介质的优化条件下，双氢青蒿素在4min左右出峰，在1～200mg/L范围内，峰高与浓度呈良好的线性关系，检出限为0.05mg/L。实验方法为：
进样前，毛细管依次用0.1mol的Na0H、二次蒸馏水和缓冲溶液各冲洗约5mi，每两次进样之间用缓冲溶液冲洗约2min以保证其重现性。实验用柱端安培检测，三电极体系:毛细管工作电极、饱和甘汞电极和Pt对电极。采用重力进样方式，进样高度20cm，进样时间10s。
参考文献：
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