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肌酐是如何衡量肾小球功能的重要指标? 1

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肌酐是肌酸脱去一个分子水缩合而成的物质。肌酐生成后通过肾小球过滤并从尿中排出,因此被视为衡量肾小球功能的重要指标。血浆肌酐浓度取决于生成率和排除率,生成率与肌酸及磷酸肌酸的代谢有关,排除率与肾小球的过滤功能有关。与尿素氮相比,肌酐对肾脏功能的评估更为特异。常用的测定方法是碱性苦味酸法。目前已有特异性好、适用于自动化的酶学测定的商品试剂盒供应,并已开始推广。参考值(血清):苦味酸法27~71μmol/L;酶法3~54μmol/L(男),44~97μmol/L(女)。肌酐升高见于肾功能不全、严重肌肉损伤、肌营养不良等;降低常见于甲状腺机能低下及肝硬化等。

肌酐酶法的应用

目前肌酐酶法的测定主要有两种方法。一种是监测肌酐亚氨水解酶偶联谷氨酸脱氢酶变化的酶动力学测定,另一种是肌酐氨基水解酶偶联肌氨酸氧化酶和过氧化物酶发生Trinder反应的酶动力学测定。后者的试剂价格相对较低,不受血氨和其他干扰物的影响,目前已有大量的商品试剂盒供应。

1)一种抗羟苯磺酸钙药物干扰的人血清中肌酐含量检测试剂的制备方法,包括R1试剂和R2试剂。R1试剂包括3-吗啉丙磺酸、TOOS、Brij-35、庆大霉素、肌氨酸氧化酶、肌酸酶、维生素氧化酶和硫酸联氨。R2试剂包括3-吗啉丙磺酸、4-AAP、肌酐酶、Proclin300和亚铁氰化钾。通过配制R1试剂和R2试剂,并使用具有双试剂功能的全自动生化分析仪,采用双试剂终点法进行测定,可以保证检测数据的准确性。同时,在R1中加入硫酸联氨可以有效消除羟苯磺酸钙药物的干扰,从而保证临床肌酐试剂检测的准确性。该方法具有线性范围宽、抗羟苯磺酸钙药物干扰能力强、稳定性好、准确度高的特点。

2)一种测定肌酐含量的试剂盒,包括缓冲液、辅酶、肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、醛脱氢酶和稳定剂。通过将样品与试剂按一定的体积比混合,使之发生酶偶联反应,再将最终反应物置于生化分析仪下,检测主波长吸光度变化的情况(速度),从而测算出肌酐的含量。采用该方法可以通过生化分析仪器得出所需的测定结果,具有高灵敏度、好精确度,不受内外源物质的污染,便于推广应用。

3)一种酶法测定血清中肌酐含量的检测试剂盒,包含试剂R1和试剂R2。试剂R1含有3~10g/L pH7.5~8.0的缓冲液、0.2~0.5g/L EDTA、0.5~2g/L N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)间甲苯胺钠盐、1‰~5‰表面活性剂、0.2~1g/L肌氨酸氧化酶、1~5KU/L抗坏血酸氧化酶、2~5KU/L肌酸酶和0.5~1g/L稳定剂。试剂R2含有3~10g/L pH7.5~8.0的缓冲液、0.1~0.5g/L 4-氨基安替比林、0.1~0.4g/L高铁氰化钾、2~8g/L肌酐酶、1~6KU/L过氧化物酶和0.5~2g/L防腐剂。该方法稳定性好,抗干扰能力强,具有较高的临床应用价值。

主要参考资料

[1] 协和医学词典

[2] CN201810317204.6一种抗羟苯磺酸钙药物干扰的人血清中肌酐含量检测试剂

[3] CN200410065167.2肌酐含量测定方法及肌酐诊断试剂盒

[4] CN201410401289.8酶法测定血清中肌酐含量的检测试剂盒

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