碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase，简称ALP或AKP)是一种磷酸酯酶，广泛存在于哺乳动物组织中。它的活性需要在pH9.2~9.8的碱性条件下。碱性磷酸酶主要存在于细胞膜，如肠上皮、肾近曲小管、附睾上皮、肝的毛细胆管膜以及血管内皮等处。碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)是一种用于显示碱性磷酸酶活性的方法，它可以用于血液、骨髓、细胞涂片、冰冻切片和石蜡切片等样本的染色。
1、将血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片放入ALP固定液中固定3分钟(梯度入水后的石蜡切片无需固定)，然后用水洗净。
2、滴加配制好的碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)，放入湿盒中，避光孵育15～20分钟，然后用水洗净。
3、使用核固红染色液或甲基绿染色液复染3～5分钟。
4、用水洗净，进行镜检或甘油明胶封固后进行镜检。
1、取出培养的细胞，弃掉培养液，用PBS清洗干净。
2、加入碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)固定3分钟或4%多聚甲醛固定10～15分钟，然后用PBS清洗。
3、滴加配制好的碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)，放入湿盒中，避光孵育15～20分钟，然后用PBS清洗。
4、使用核固红染色液或甲基绿染色液复染3～5分钟。
5、用PBS清洗，进行镜检。
碱性磷酸酶活性部位呈蓝色。
细胞核呈红色(核固红)或绿色(甲基绿)。
适用于血液和骨髓涂片。
1.血液或骨髓细胞涂片或其他样本应保持新鲜，厚度适宜，及时固定，否则会影响酶的活性。
2.培养细胞染色过程中，清洗、染色等步骤都应轻柔，以免损伤或丢失细胞。
3.ALP孵育液易失效或降低阳性强度，因此最好即配即用，不宜久置。
4.复染时，可以选择使用核固红染色液或甲基绿染色液。
5.每次染色时，应准备阳性对照片。
[1]碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)操作说明
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