平滑肌细胞培养基SMCM是一种专门为正常人类平滑肌细胞体外培养设计的培养基。它包含了必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质和低浓度胎牛血清(2%)，并经过灭菌处理。平滑肌细胞培养基SMCM的缓冲体系为重碳酸盐，在含有5%CO2的细胞培养箱中平衡后pH值为7.4。它的配方能够选择性地促进正常人类微血管内皮细胞的增殖和生长，为其提供最理想的营养平衡状态。
平滑肌细胞培养基SMCM可用于进行平滑肌细胞增殖实验。在25cm2(50ml)一次性培养瓶中培养细胞，经过消化传代后，细胞明显比原代细胞更大，呈现出峰谷样的生长图案。随着传代次数的增多，平滑肌细胞的体积逐渐增大，突触明显并且梭形结构逐渐丧失。当细胞生长密集时，细胞会逐层环绕并形成结节状。将酶消化法获得的细胞传代至第3代，分别使用平滑肌细胞培养基SMCM或含有10％新生牛血清的DMEM/F12培养基(10％-F12)进行培养，并及时记录细胞的生长情况。将第3代平滑肌细胞以每孔2000个细胞的标准接种于96孔板内，每个样本需重复3～4个辅助测量孔。将96孔板放置于细胞培养箱内，6小时后观察细胞的贴壁和舒展情况。使用每100μl培养基加10μlCCK-8试剂的比例配置混悬剂。清除各待测孔的培养基后，加入100μl混悬剂。将96孔板放置于培养箱内2小时后取出，放置于微孔板振荡器上震荡1分钟，然后将96孔板转至酶标仪，在450nm波长下读取各孔的数据并记录。测量吸光值后的孔不再重复使用。每24小时测量一次实验孔的吸光值，连续测量9天(216小时)。实验结果显示，平滑肌细胞在SMCS中呈现出典型的细胞增殖S型曲线，而在10％-F12中增殖缓慢甚至停滞。
[1]CN201810075925.0一种食管胃结合部平滑肌细胞的酶消化法原代培养及鉴定方法
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