尿素-13C呼气试验的原理和应用是什么? ¹

尿素-13C呼气试验是一种用于检测幽门螺杆菌感染的方法。该方法通过口服经过稳定核素[13C]标记的底物，利用同位素比值质谱仪检测底物的最终代谢产物13CO2的变化来研究机体内代谢反应和生理过程。为了保证准确性，尿素[13C]的丰度要求达到99%以上。

如何检测尿素[13C]的丰度？

尿素[13C]的丰度检测方法包括以下步骤：

S1.取尿素[13C]颗粒，进行研磨，精确称取0.5g，放入20ml量瓶中，加入适量的乙腈，进行超声处理9-15分钟，冷却至室温后，加入乙腈稀释至刻度，摇匀，取溶液，经过10000r/min离心9-15分钟，取上清液作为供试品溶液。

S2.取供试品溶液1μl注入液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用仪，记录产生的色谱图和准分子离子（12C16ON2H5+、13C16ON2H5+、13C18ON2H5+，质量数分别为61.0402、62.0435、64.0478，分别标示为A、B、C）的离子信号响应强度，通过计算得到尿素[13C]的丰度，计算公式为：X=(B+C）/（A+ B+C) ×100%。

具体的色谱条件为：采用HILIC色谱柱（2.1*100mm，1.7μm），流动相A为乙腈，流动相B为1mmol/L的乙酸铵溶液，进行梯度洗脱(0-4min,95%A→50%A;4-4.5min,50%A→95%A;4.5-8min,95%A)，流速为0.2－0.4ml/min，柱温33－36℃；质谱条件为：采用电喷雾正离子化（ESI+）检测，扫描范围m/z60～121，毛细管电压3.0KV，锥孔电压8V，源温度96－101℃，脱溶剂气温度440－455℃，脱溶剂气流速740－805L/h。

尿素-13C呼气试验的应用

CN201610984845.8公开了一种新型尿素-13C检测药剂，用于检测幽门螺杆菌。该药剂的组分包括尿素[13C]、枸橼酸、枸橼酸钠、矫味剂和甘露醇，通过分比例混合及特殊设备工艺方法制得的产品含量均匀性好，使用时溶解速度更快，能更快速与幽门螺门杆菌发生反应。相比常规方法，该药剂能够降低假阴性结果的发生，并且口感更好，特别适用于儿童服用。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201610984856.6 尿素[13C]丰度检测方法【公开】/尿素[13C]丰度检测方法【授权】

[2] CN201610984845.8一种新型尿素[13C]检测药剂