薄层层析是一种重要的实验技术,用于快速分离和定性分析少量物质。它结合了柱色谱和纸色谱的优点,适用于少量样品的分离,并可用于精致样品。薄层层析特别适用于无法用气相色谱分析的物质。在此过程中,需要使用薄层层析硅胶板。
薄层色谱是一种吸附色谱技术,利用各组分在两相之间发生多次吸附-解吸附平衡来实现分离。吸附强的组分移动慢,吸附弱的组分移动快,从而实现分离。在薄层板上形成不同距离的斑点。
溶剂的选择对组分分离关系非常重要。根据被分离物质与所选吸附剂的性质,选择合适的洗脱剂。对于弱极性物质,选择弱极性溶剂作为洗脱剂;对于强极性物质,选择极性溶剂作为洗脱剂。如果使用吸附性较弱的吸附剂,则洗脱剂的极性也需要相应降低。
薄层层析硅胶板可用于以下应用:
在柱层操作时,可以采用干法或将样品溶解后加入。溶解样品的溶剂应选择极性较小的,以便被分离的成分可以被吸附。然后逐渐增大溶剂的极性,通过“梯度洗脱”逐个洗脱吸附在层析柱上的各个成分。需要注意的是,溶剂的极性增大过快会影响分离效果。
对于非极性吸附剂,如活性炭,其洗脱顺序与极性吸附剂相反。