细菌基因敲除技术求助？

大家好，我最近在做细菌基因敲除，已经筛到了单交换菌株，接着将单交换菌株发酵液涂布于10%蔗糖平板中，挑斑检测，一直筛不到双交换，有朋友做过这方面的实验吗？求指教

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共6个回答

蔗糖压力筛选的概率低

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建议先验证蔗糖是否对该单交换菌株有灭杀作用，可以用不加蔗糖的培养基涂布对照。

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我们经常做SacB基因载体的敲除实验，双交换概率约为0.2%左右
这个我已经筛了很久了，就是筛不到，无奈

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这个我已经筛了很久了，就是筛不到，无奈
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有些基因很好筛到，有些基因怎么筛都筛不到，请教一下你们每个目的基因都能被敲掉吗？

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我们经常做SacB基因载体的敲除实验，双交换概率约为0.2%左右

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刚看到一个文献说，双交换概率较低，需要大量筛选，那个文章上的概率大概是17%，仅供参考，我也在学习

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