各位大神好!请熟悉聚丙烯酰胺凝胶的大神帮我止点迷津,万分感谢!我需要配的胶配方如下:
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一水柠檬酸 12.45g;
柠檬酸钠 11.985g;
丙烯酰胺 47.5g;
甲叉双丙烯酰胺 2.5g;
牛血清白蛋白冻干粉 10g;
甘油30ml
蒸馏水定容至500ml
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激活对为:
L-抗坏血酸 0.5g
1%FeSO4 1.25ml
3%H2O2 1.5ml
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以上为配方,实际配制过程当中,我是这么配的:
牛血清白蛋白溶于300ml蒸馏水
↓
一水柠檬酸 11.45g(要求是12.45g,由于激活剂中的L-抗坏血酸需要在PH为2左右才溶于水,所以留取1g在后面用10ml蒸馏水溶解抗坏血酸)
↓
柠檬酸钠 11.985g
↓
甘油 30ml
↓
甲叉双丙烯酰胺 2.5g
↓
丙烯酰胺 47.5g
↓
蒸馏水定容至490ml
↓
1% FeSO4 1.25ml
↓
1%H2O2 1.5ml
↓
1g一水柠檬酸溶于10ml蒸馏水,再溶解0.5g抗坏血酸
↓
开始聚合凝固,但凝固的过程中,整个胶体从透明变成了乳白色(图1和图2)
而我们要求的是蛋白不能变性,整个胶配完继续透明。文献当中也始终是透明的(图3),请高手指点。
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