工艺技术

求助，流动相紫外吸收大于样品的吸收，该怎么办?

用的是阴离子交换柱，流动相是缓冲盐的水溶液，比如200mM的乙酸铵，样品是溶于在超纯水中的。流动相的紫外吸收比分析样品的紫外吸收大很多，都做等度洗脱，流动相条件和样品都和文献中的完全一样，发现有几个问题：1 产生负峰2 不同流动相浓度的时候，色谱图上有的时候会出现一个大台阶，然后看不到样品的峰。产生负峰是不是可以用流动相来配样品来消除？看不到样品的峰是不是因为流动相的吸收比样品强很多，导致样品的峰被掩盖？大台阶是怎么回事？那些现象怎么消除啊？求好的建议。

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共7个回答

她的混世大魔，给排水工程师 2019-01-13回答

1.是否考虑更换检测波长，尽量少用短波长；2.若波长无法选择，用流动相配置或稀释样本溶液是对的。3.更换缓冲体系，最好无机盐缓冲体系，比有机盐体系背景吸收值要小些。4.缓冲盐体系纯度要考虑。

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Hug，销售 2019-01-13回答

不知道你的检测器是UV还是DAD,上次有个同事遇到了出负峰是由于他设置了参比波长。DAD检测器一般样品都是选择用流动相来溶解的。你的样品有没有自己扫一下紫外，看看他的吸收，（这里可以用你的流动相来做参 ... 嗯，谢谢。

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晴明煦光，销售 2019-01-13回答

跟进样阀关系不大，此种情况多半检测波长小，有机盐缓冲体系。有机盐在短波长有大吸收信号，这样会产生负峰。... 谢谢回复！是的！样品的吸收就在230nm以下，有机盐的吸收很大，但是因为以后要连质谱，所以必须得用有机盐，扫了紫外，用流动相配了溶液，我再用不同波长做来看看会不会改进吧。另外，如果需要优化流动相（缓冲盐）的浓度，那使用流动相稀释样品时，要选择什么浓度的流动相来稀释呢？谢谢，

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蜡笔.小新.，油库操作员 2019-01-13回答

不知道你的检测器是UV还是DAD,上次有个同事遇到了出负峰是由于他设置了参比波长。DAD检测器一般样品都是选择用流动相来溶解的。你的样品有没有自己扫一下紫外，看看他的吸收，（这里可以用你的流动相来做参比的）??你的标题好吸引人。。。

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可乐，仪表维修员 2019-01-13回答

可能是进样阀有问题，或是污染或有杂质跟进样阀关系不大，此种情况多半检测波长小，有机盐缓冲体系。有机盐在短波长有大吸收信号，这样会产生负峰。

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情初°初晴°，给排水工程师 2019-01-13回答

另外，如果能证明负峰就是待测物出峰时间，负峰检测未尝不可，只要呈线性关系，转换输出端正负连接点不就可以吗。文献是参考，你的条件不可能与他完全一致，灵活最重要，切记。

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