凝胶色谱法是一种常用的分离分析方法，它通过使用凝胶填充剂来实现分子的分离和纯化。凝胶填充剂具有立体网状结构，能吸收水分或其他极性溶剂，并在内部形成孔隙。根据分子的大小，不同大小的分子能够以不同程度渗透到孔隙内部，从而实现分离。
凝胶色谱可以被称为分子筛色谱、凝胶渗透色谱、分子排阻色谱和凝胶过滤等，虽然名称不同，但使用的技术是相同的。在凝胶色谱中，溶质在外水体积和内水体积之间进行分配，根据色谱的基本方程VR=Vm+KVs，溶质的保留体积取决于分配系数K。
最简单和最理想的凝胶色谱形式是假设凝胶颗粒内的孔隙呈圆锥形，且具有相同的形状和大小。根据溶质分子的大小，它们能够以不同程度渗透到圆锥体孔隙内，从而实现分离。在凝胶色谱中，分配等温线呈线性，洗脱峰为对称形高斯曲线。
然而，在实际应用中，凝胶色谱常常伴随着其他机理的作用。例如，一些小分子不能进入凝胶颗粒吸附的内水体积，使其分配系数小于1。另外，凝胶还具有吸附力，可以使溶质分子保留在其表面。因此，凝胶色谱的应用需要考虑这些因素。
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