MDCK细胞是一种来源于考克斯班尼犬肾脏的细胞系,经过多次消化纯化得到上皮样细胞。这种细胞具有远段肾小管与集合管的特性,被广泛用作远曲小管或集合管的模型。此外,MDCK细胞还可用于代谢研究、药物相互作用研究以及观察流感病毒对细胞功能的影响。
MDCK细胞系广泛应用于多种病毒的扩增和纯化,如呼肠孤病毒、腺病毒、犬细小病毒、猫粒细胞缺乏症病毒以及禽流感病毒等。由于其高感染效率、快速增殖且不易变异的特点,MDCK细胞系被公认为最适于甲、乙型流感病毒疫苗生产的细胞系之一。
通过研究微载体和血清对细胞生长的影响以及感染参数对病毒生产效率的影响,确定了基于MDCK细胞培养的流感疫苗生产的基本工艺。研究结果表明,Cytodex-1和Cytodex-3两种微载体均能支持MDCK细胞正常贴附生长,而胎牛血清对细胞生长的促进作用优于新生小牛血清。在适宜的培养基和贴附基质条件下,MDCK细胞的生长密度可达到较高水平。此外,病毒增殖过程中的关键参数也对病毒产量有显著影响。根据这些研究结果,建立了基于MDCK细胞生物反应器培养的流感病毒基本生产工艺,实现了较高的病毒产量。
然而,为了进一步提高生产效率,还需要优化维持培养基的关键组分,以满足细胞产毒期的需求。研究发现,在产毒期进行换液操作可以显著提高单位细胞的病毒产量,因此改善培养环境的营养供给对病毒高效增殖至关重要。
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