基因克隆技术的发展与应用？ ¹

基因克隆技术是一种重要的实验技术，它通过将目的基因与具有自主复制能力的载体DNA进行体外重组，从而获得新的重组DNA，并将其导入受体细胞中表达相应蛋白。这项技术不仅可以用于研究蛋白结构、功能和与其他分子的相互作用，还可以应用于RNA的研究。

基因克隆技术经历了三个发展阶段。第一个阶段是20世纪70年代初经典的基因克隆技术的创建，该技术需要限制性内切酶和连接酶的参与，至今仍被广泛应用。第二个阶段是20世纪90年代初不依赖连接酶的克隆方法的出现，这种方法不仅不需要连接酶，还受限制性内切酶的限制，使得基因克隆更加灵活。第三个阶段是21世纪初将重组酶运用到基因克隆中，使基因克隆更加强大、靶向性更强、操作更简便。

基因克隆技术的基本原理

基因克隆技术的特点

主要参考文献

[1] 兰泓，张玉祥。基因克隆技术及其进展。中国医药生物技术 2015年10月第10卷第5期。