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如何使用四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)进行沙门氏菌选择性增菌培养? 1

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四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)是一种用于沙门氏菌选择性增菌培养的培养基。它的配方包括蛋白胨、牛肉膏粉、氯化钠、碳酸钙、无水硫代硫酸钠、牛胆盐等成分,最终pH值为7.0±0.2。

工作原理

蛋白胨和牛肉膏粉提供了细菌生长所需的碳源、氮源和维生素;氯化钠维持了适当的渗透压;碳酸钙可以中和细菌产生的酸性物质并吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠的结合可以抑制肠道共生菌的生长,而含有四硫磺酸钠还原酶的细菌则可以在该培养基中繁殖;胆盐和煌绿则可以抑制大肠杆菌和其他革兰氏阳性细菌的生长。

使用方法

1、取93.6g的四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB),加入1L蒸馏水或去离子水中,搅拌加热至完全溶解,分装于三角瓶中,每瓶100mL。

2、将三角瓶放入灭菌锅中,进行121℃高压灭菌20分钟,冷至30℃。每100mL基础培养基中加入四硫磺酸钠煌绿增菌液配套试剂(SR0040)2支,混合均匀,即可得到四硫磺酸钠煌绿增菌液,或再添加2支新生霉素(SR0030)配成MKTTn肉汤。

3、在无菌环境中,取1mL增菌液转种于10mL的TTB/MKTTn中,或取25mL前增菌液转种于225mL的TTB中。

4、将已接种的试管放入恒温培养箱中,以42℃培养18-24小时。

5、观察结果。

参考文献

[1]四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)产品介绍

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