分离纯化现在主要是纯化多糖和蛋白质,离子交换用的填料种类也比较多,比如DEAE Sepharose FF和DEAE纤维素-52应该是最常用两种填料,洗脱过程原理应该差不多。
问题一:为什么DEAE FF需要缓冲液提供一定的ph环境,DEAE 纤维素-52则不需要,用的纯水。
问题二:有人解答是缓冲液提供的ph环境,能让样品带负电,那原理是怎样的呢?
问题三(最疑惑):洗脱完毕,用NaCl或NaOH再生时,Cl-和OH-离子已经和交换基团结合满了,再上样品(多糖或蛋白质)时怎么又能和样品结合呢?可能是样品结合能力强吧?如果是结合能力强,那怎么又能用NaCl或NaOH洗脱下来呢?
很疑惑啊!!