人肠微血管内皮细胞的应用及其对嗜中性粒细胞杀菌功能的影响？ ¹

背景信息

人肠微血管内皮细胞是通过胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法和内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。这些细胞可以通过特定抗体的免疫荧光鉴定和染色来确认其身份。此外，这些细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母菌和真菌。

人肠微血管内皮细胞分离自肠道组织，肠道是从胃幽门至肛门的消化管的一部分。肠道包括小肠、大肠和直肠，其中小肠是消化和吸收食物的主要部位，而大肠和直肠则主要负责浓缩食物残渣和排泄。肠道也是人体内最大的微生态系统之一。微血管是非常细小的血管，其功能是促进血液和组织之间的物质交换。

操作方法

在收到人肠微血管内皮细胞后，请按照以下步骤进行操作：

1. 取出细胞瓶，用75%酒精消毒后拆下封口膜，然后将瓶子放入37℃、5%CO2的培养箱中静置6-8小时或过夜，以稳定细胞状态。
2. 终末分化的细胞建议直接使用，不建议扩大培养。
3. 待细胞状态稳定后，准备转孔培养进行实验。

应用及对嗜中性粒细胞杀菌功能的影响

研究微血管内皮细胞对嗜中性粒细胞杀菌功能的影响

该研究旨在探究微血管内皮细胞是否对嗜中性粒细胞的杀菌功能产生影响，从而为筛选有效的抗菌药物提供理论基础。

研究方法：通过建立大鼠肠黏膜微血管内皮细胞的中性粒细胞迁移模型，利用Transwell通透性支持物，检测了血液中性粒细胞和跨内皮迁移的中性粒细胞对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和嗜酸乳杆菌的杀菌情况。同时，利用酶标仪检测中性粒细胞MMP-9的浓度和荧光测定法检测溶菌酶的活性。

研究结果：

1. 血液中性粒细胞只能吞噬细菌，无法完全消灭细菌。
2. 损伤了LPS和HLa的RIMVECs使跨内皮迁移的中性粒细胞失去了胞内胞外杀菌的能力。
3. IL-1α诱导的RIMVECs使跨内皮迁移的中性粒细胞具有胞内胞外杀灭革兰氏阳性菌的能力。
4. LTB4和fMLP+CytB趋化的嗜中性粒细胞对胞内外杀菌效果明显。
5. IL-1c使跨内皮迁移的中性粒细胞MMP-9浓度和溶菌酶活性显著升高。

参考文献

[1] Marjan Rafat, Lisa S. Rotenstein, Jennifer L. Hu, Debra T. Auguste. Engineered endothelial cell adhesion via VCAM1 and E-selectin antibody-presenting alginate hydrogels. Acta Biomaterialia. 2012(7).

[2] Shannon Jones Hostetter. Neutrophil Function in Small Animals. Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice. 2012(1).

[3] Marcie R. Williams, Verónica Azcutia, Gail Newton, Pilar Alcaide, Francis W. Luscinskas. Emerging mechanisms of neutrophil recruitment across endothelium. Trends in Immunology. 2011(10).

[4] Rico C. Gunawan, Dariela Almeda, Debra T. Auguste. Complementary targeting of liposomes to IL-1α and TNF-α activated endothelial cells via the transient expression of VCAM1 and E-selectin. Biomaterials. 2011(36).

[5] 刘晓晔. 微血管内皮细胞对嗜中性粒细胞杀菌功能的影响[D]. 北京农学院, 2014.