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收细胞后裂解后收蛋白12000rpm,10min,液面附近有絮状物产生?

我收细胞后裂解后收蛋白12000rpm,10min,发现在液面附近有絮状物产生,不知道是什么原因?电泳时带之间出现连接在一起的情况,电泳效果相当不好。我裂解应该是充分的,冰上裂了30分钟,在EP管里也有20分钟,是裂解液的量不够的缘故? 我收的是293E,液体并不粘稠,以前收没出现过,最近出现的,不过我没加SDS,有可能是脂肪吗?收起来后也震荡了


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共1个回答
300ug……这个早已超过WB的极限了。一般30-50ug完全能够得到很好的结果的~上样量太大的结果就是条带分不开,很难看,而且杂带很多,背景不清晰。
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