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小弟刚买回来100克葡聚糖G?

小弟刚买回来100克葡聚糖G-15填料,不知道如何处理,没有说明书----求指导的大神帮帮忙吧!有谁用过的,或者有说明书的给小弟一份吧,我就是不知道,怎么处理,一直到装柱子,具体怎么操作,有谁用过的给指点一下吧!!!!!!谢谢大家了!!!!
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共40个回答
不好意思,我还有一个问题,就是上柱子前需要脱气,这个步骤是怎么操作的啊?...
上柱子用的液体超声脱气,或者泵抽气。
答非所问,没做过的话最好不要误人子弟。从别的地方粘过来,却不知道这样的答案一点用处都没有。...
大神,求助,就是我今天超声乙醇溶液的时候,在容量瓶刻度线附近大概聚集了大概10个左右气泡,超声半天也除不掉,这个怎么办啊?会不会影响呢?
还有您说的这句----再以缓冲溶液(pH7.0的Tris—醋酸溶液)洗涤2—3次,使pH和离子强度达到平衡,最后抽去溶液及凝胶颗粒内部气泡,凝胶可保存在缓冲液内。 那上柱子的时候这个凝胶不就是在缓冲溶液中么?
我是不是 ...
对的,上柱子的时候把缓冲液置换出来。
您好,那您说这个膨胀体积:2.5-3.5ml/g是加水的时候的膨胀体积是这么大是吧?大概是3倍左右,您说乙醇的膨胀体积比水小,那是不是我就应该多加点乙醇,比如100克填料加入400ML乙醇,这个乙醇和去离子水加多点没什 ...
再多一些都没有问题,你上柱子的时候膨胀完的填料里面也要加水,要多出三分之一的清水才可以。
葡聚糖G15与G25处理方法一样,供参考。
1.实验凝胶的制备:商品凝胶是干燥的颗粒,使用时需经溶胀处理,称取4克葡聚糖凝胶G—25,加50毫升蒸馏水,搅拌均匀,在室温溶胀6小时,或沸水浴溶胀 2小时,一般采用后一种 ...
您的回复太有用了,非常感谢啊!但是我看见一些资料说,先用50-60%的乙醇泡24小时,之后再用去离子水泡24小时,之后缓冲溶液泡才上柱子,这种方法靠谱么?还有小弟想请教一下,我的柱子大概60cm长,我现在有100克填料,我得大概取多少合适啊?
还有您说的第一步4克填料加50毫升水,这个比例是怎么来的?有参考?还是固定的?
答非所问,没做过的话最好不要误人子弟。从别的地方粘过来,却不知道这样的答案一点用处都没有。...
没事,我已经解决了,我多超声一会气泡就没了,我现在已经泡上了,这个是不是得隔一阵子就得搅拌一下,是吧?
您好,那您说这个膨胀体积:2.5-3.5ml/g是加水的时候的膨胀体积是这么大是吧?大概是3倍左右,您说乙醇的膨胀体积比水小,那是不是我就应该多加点乙醇,比如100克填料加入400ML乙醇,这个乙醇和去离子水加多点没什 ...
再多一些都没有问题,你上柱子的时候膨胀完的填料里面也要加水,要多出三分之一的清水才可以。
以下供参考:
   凝胶过滤填料的分离范围表
   SephadexG-10葡聚糖凝胶 G-10    分离范围<700 适用于脱盐、肽与其它小分子的分离
   Sephadex G-15 葡聚糖凝胶 G-15   ...
答非所问,没做过的话最好不要误人子弟。从别的地方粘过来,却不知道这样的答案一点用处都没有。
其实好多方法都是大同小异,用乙醇,去离子水溶胀都可以,但是最后都要是水。还有上柱子的话最好是用水上,否则你弄得柱子和仪器上都是缓冲液,干了以后不好清洗,很容易腐蚀仪器。比例的话你可以看一下说明书,应 ...
因为买的是国产的,我看了一下它就有一个数据:膨胀体积:2.5-3.5ml/g,是不是意思就是我的一克填料大概能膨胀成3克左右,哪我是不是应该加乙醇和去离子水使其膨胀的前处理都是填料的3倍啊?就是我100克的调料加300毫升水?
您的回复太有用了,非常感谢啊!但是我看见一些资料说,先用50-60%的乙醇泡24小时,之后再用去离子水泡24小时,之后缓冲溶液泡才上柱子,这种方法靠谱么?还有小弟想请教一下,我的柱子大概60cm长,我现在有100克填 ...
其实好多方法都是大同小异,用乙醇,去离子水溶胀都可以,但是最后都要是水。还有上柱子的话最好是用水上,否则你弄得柱子和仪器上都是缓冲液,干了以后不好清洗,很容易腐蚀仪器。比例的话你可以看一下说明书,应该有个溶胀的比例。说明书在GE网站上都可以查到的。
再多一些都没有问题,你上柱子的时候膨胀完的填料里面也要加水,要多出三分之一的清水才可以。...
太感谢你的回复了,还有一个问题就是上样的时候,我查资料说,最好是凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,这个柱床体积是怎么计算的?我以前没过过柱子,不懂!
我现在就是把上层的清澈的乙醇倒出来了,之后还有一部分乙醇和填料成浑浊,不能倒了,一倒填料就出来了,这样的话我就可以开始用水洗了是吧?...
可以
答非所问,没做过的话最好不要误人子弟。从别的地方粘过来,却不知道这样的答案一点用处都没有。...
室温下,将干粉浸泡于50%-60%乙醇中至少24h,不断搅拌已保证凝胶溶胀,用无盐水洗去残存的乙醇滤干。

求问它这个最后一步,是不是就是用去离子水多洗几次把乙醇带出来?这个滤干怎么操作呢?
不好意思,我还有一个问题,就是上柱子前需要脱气,这个步骤是怎么操作的啊?...
上柱子用的液体超声脱气,或者泵抽气。
用乙醇和去离子水的膨胀比不一样的,用乙醇比去离子水的膨胀体积小。应该是1g填料膨胀到2.5-3.5ml。水可以加多点,膨胀完全了,本身就不再吸水了,静止的话会有上清的水出来的。...
您好,那您说这个膨胀体积:2.5-3.5ml/g是加水的时候的膨胀体积是这么大是吧?大概是3倍左右,您说乙醇的膨胀体积比水小,那是不是我就应该多加点乙醇,比如100克填料加入400ML乙醇,这个乙醇和去离子水加多点没什么问题吧?是不是只要我加入的水或者乙醇淹没填料就可以了?
我就把我的填料和去离子水的悬浮液的烧杯,直接放在超声仪里面,超声脱气就行了吧?大概多长时间,这个有限制么?...
填料不超声呀,所用的溶液和水要超声
葡聚糖G15与G25处理方法一样,供参考。
1.实验凝胶的制备:商品凝胶是干燥的颗粒,使用时需经溶胀处理,称取4克葡聚糖凝胶G—25,加50毫升蒸馏水,搅拌均匀,在室温溶胀6小时,或沸水浴溶胀 2小时,一般采用后一种 ...
我泡盐酸那步今天已经快结束了,之后就是水洗到中性了,在上柱子之前,我看你给我留的建议中是---最后抽去溶液及凝胶颗粒内部气泡--这步骤怎么操作啊?还有凝胶要是暂时不上柱子的话,就泡在去离子水里面行么?我看别人都说要泡在20%的乙醇中?哪个对啊?
上柱子用的液体超声脱气,或者泵抽气。...
我就把我的填料和去离子水的悬浮液的烧杯,直接放在超声仪里面,超声脱气就行了吧?大概多长时间,这个有限制么?
大神,这是我求到的一个方法,它这里没有提到用缓冲溶液泡,这个步骤靠谱么?

3.1 乙醇浸泡(300毫升无水乙醇加高纯水至500毫升定容)--超声15分钟脱气
    在室温下,将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时,并 ...
我没这么做过,你可以试一下。
对的,上柱子的时候把缓冲液置换出来。...
不好意思,我还有一个问题,就是上柱子前需要脱气,这个步骤是怎么操作的啊?
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