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从鼻腔拭子中筛选微生...
生物医学工程
从鼻腔拭子中筛选微生物DNA,用16SrDNA的通用引物可以吗?
我想检测鼻腔微生物种群特点,尽量选出所有微生物的DNA,所以不考虑细菌培养的方法,通用的16S rDNA引物可以达到我的实验目的吗?还是我需要特异性的设计引物?
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惹眼,设备工程师
2019-02-09回答
我们这边有做过唾液的。并且用dgge和高通量测序都做过。选用一个好的试剂盒就是了,DGGE的话你看参考文献里面有通用引物,注意这个引物上引是带GC夹子的。高通量的话,直接送公司做就是了
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肆,设备工程师
2019-02-09回答
看你的实验目的,如果只是单纯的想了解群落结构和物种构成的话,做16s就可以了,这样的话3-5个棉拭子提供给公司一般是没有问题的。不用担心宿主污染的问题,因为引物特异性可以一定程度避免这个干扰。但是如果您要关注的除了群落结构和物种,还想关注微生物功能,就要做宏基因组了。不过做宏基因组需要的样本量会多一些,另外,考虑到可能的宿主污染,可以加大测序数据量,通过比对宿主基因组的方法除去一部分宿主污染的数据。
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