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背景及概述 惕格酸是一种具有焦糖甜味、烘烤暖香、酸辣及熟水果香气的化合物,常存在于芹菜叶中。 应用 惕格酸可以直接用于朗姆、焦糖、面包、水果和果酱香精配方中,其酯类产品在香精配方中具有更广泛的用途。 制备 惕格酸的合成方法有多种,其中一种简便的方法是使用格氏试剂与丙酮酸或α-丁酮酸在常温条件下进行加成反应,然后通过脱水反应得到惕格酸。 图1 惕格酸的合成路线图 实验操作: 将镁屑和四氢呋喃加入反应瓶中,滴加溴乙烷溶液,待格氏引发后,继续反应。制备好的乙基格氏试剂与HMPA反应,然后与丙酮酸反应得到中间体III。中间体III在硫酸溶液作用下发生脱水反应得到惕格酸。 参考文献 [1] CN 105439848A ...
鸟氨酸是一种重要的氨基酸,具有广泛的生理和药理作用。为了合成活性多肽分子并避免副产物的生成,保护鸟氨酸是必要的。 保护鸟氨酸的方法之一是使用叔丁氧羰基-L-鸟氨酸。这种化合物可以保护鸟氨酸,防止其参与反应并避免副反应的进行。 如何制备叔丁氧羰基-L-鸟氨酸? 制备叔丁氧羰基-L-鸟氨酸的步骤如下: 步骤1:合成N-苄氧羰基-L-鸟氨酸铜配合物。 步骤2:合成N-苄氧羰基-L-鸟氨酸。 步骤3:合成N-苄氧羰基-叔丁氧羰基-L-鸟氨酸。 步骤4:合成叔丁氧羰基-L-鸟氨酸。 具体的合成方法请参考下图: 主要参考资料 [1] 张玲, 陈曦, 贾根光, 等. N-保护鸟氨酸的合成[J]. 化学世界, 2011, 52(4): 239-243. ...
趋化因子是一类小分子蛋白质,参与多种病理生理过程,包括免疫细胞杀伤肿瘤细胞和促进肿瘤细胞增殖。根据结构不同,趋化因子可分为C、CC、CXC及CX3C四个亚族。 Recombinant Rat LIX/CXCL5对于 RCC 细胞生物学行为的影响 2.1 CXCL5 在肾癌细胞中的表达情况 通过qRT-PCR验证了CXCL5在三个肾癌细胞系中的表达情况,结果显示肾癌细胞系中Recombinant Rat LIX/CXCL5的表达水平较高。 2.2 Recombinant Rat LIX/CXCL5降表达对于体外细胞的影响 通过慢病毒感染构建了CXCL5过表达和敲除的稳定细胞系,实验结果表明敲降CXCL5的肿瘤细胞外观老化、坏死,细胞增殖能力下降,并且其促进内皮细胞成管的能力明显下降。 2.3 Recombinant Rat LIX/CXCL5 对于体内 RCC 生长的影响 通过裸鼠皮下移植瘤模型实验证实,敲降CXCL5的肿瘤细胞生长发育受到明显抑制,血管生成和细胞分裂也受到抑制。 2.4 Recombinant Rat LIX/CXCL5 对于肾细胞癌 EMT 的影响 通过Western Blot检测发现,敲降CXCL5组中E-cadherin的表达水平升高,Vimentin的表达水平降低,而过表达CXCL5的结果相反。 参考文献 [1]非小细胞肺癌组织CXCL5、CXCR2表达变化及其意义 胡剑 刘迪 许川 梅宏 韩连奎 李震宇 刘波 [2]CXCL5 通过抑制自噬作用促进肾细胞癌进展.李宏蕾 ...
抗体测序服务利用DASS抗体测序技术平台为客户提供精准的抗体测序服务。该技术平台能够对抗体全序列进行解析,并保证测得抗体序列的准确度为100%。此外,DASS技术平台还可以提供抗体上的翻译后修饰等信息的分析。同时,该平台还能够对IgM和化学/生物耦联抗体进行测序。 除了提供仿制药抗体测序服务,我们还可以根据客户要求提供专业的单克隆抗体测序服务。无论是哪种物种、抗体亚型还是抗体类型,我们都能保证进行100%准确的测序。对于染料共价结合的偶联抗体,虽然目前还无法进行完整且准确的序列测定,但对这些样品的序列测定成功率已高达99%。 传统的方法是从专利和文献中查找已报道的基因或蛋白序列来获取市场上现有的单克隆抗体等重组蛋白的序列信息。然而,目前几乎所有的药企都不会公布抗体的真实序列,而是将这些序列隐藏在一份专利中的几个或者几十个序列中。根据项目经验,市场上的重组抗体或蛋白的测序与已报道的序列之间多少存在一些差别。 因此,确认精准的序列信息对于生物仿制药应用领域至关重要。而想获知这些抗体序列的唯一方法就是对其进行准确且完整的测序。通过利用DASS抗体测序技术平台技术与方法,我们可以对这些产品进行100%全序列覆盖式、冗余正交法测序,以达到这一目标。 仿制药抗体测序服务的应用 仿制药抗体测序服务在全球抗体药物市场中具有重要的应用价值。根据统计数据,全球抗体药物市场规模不断增长,且抗体药物在生物制药中的市场份额也在不断提高。中国仿制药市场潜力巨大,特别是在抗体药物领域。随着生物专利药到期,中国仿制抗体药物将迎来新的发展机遇。 目前,全球前六大单抗销售排名的药物将在2019年前到期,这将对单抗行业产生重大影响。为了促进仿制药的研发和生产,中国相关部门已经发布了一系列政策文件。根据这些政策文件,将会逐步发布鼓励仿制的药品目录,以满足临床用药需求。 参考文献 [1]Computationally modelled receptors for drug monitoring using an optical based biomimetic SPR sensor[J].Zeynep Altintas,Benoit France,Jose O.Ortiz,Ibtisam E.Tothill.Sensors&Actuators:B.Chemical.2016 [2]Cancer statistics,2014[J].Rebecca Siegel,Jiemin Ma,Zhaohui Zou,Ahmedin Jemal.CA A Cancer Journal for Clinicians.2014(1) [3]Development of an Au/ZnO thin film surface plasmon resonance-based biosensor immunoassay for the detection of carbohydrate antigen 15‐3 in human saliva[J].Yang-Hung Liang,Chia-Chen Chang,Chien-Cheng Chen,Yu Chu-Su,Chii-Wann Lin.Clinical Biochemistry.2012(18) [4]Binding and neutralization of vascular endothelial growth factor(VEGF)and related ligands by VEGF Trap,ranibizumab and bevacizumab[J].Nicholas Papadopoulos,Joel Martin,Qin Ruan,Ashique Rafique,Michael P.Rosconi,Ergang Shi,Erica A.Pyles,George D.Yancopoulos,Neil Stahl,Stanley J.Wiegand.Angiogenesis.2012(2) [5]Surface plasmon resonance immunosensor for cortisol and cortisone determination[J].Marco Frasconi,Monica Mazzarino,Francesco Botrè,Franco Mazzei.Analytical and Bioanalytical Chemistry.2009(8) [6]张发宝,郭建福.中国生物仿制药的业态体系[J].高科技与产业化,2011(10):61-62. [7]刘亮.国内外生物仿制药监管政策情报研究[D].中国人民解放军军事医学科学院,2016. [8]李婷婷.我国与全球单克隆抗体药物产业的对比分析及发展趋势预测[D].山东大学,2014. ...
猫肾细胞系F81是通过传代克隆筛选转化而来的工程细胞系,具有贴壁生长的特点,并可进行连续传代培养。该细胞系对多种宠物病和特产经济动物病病毒非常敏感,如犬细小病毒、猫泛白细胞减少症病毒、猫杯状病毒、猫传染性鼻气管炎病毒、水貂病毒性肠炎病毒等,因此被广泛应用于这些疫病疫苗病毒的制备。 研究者还在F81/猫肾细胞中开发了一种犬细小病毒原位PCR的检测方法。通过在染毒12小时、24小时和48小时后,使用特异性引物进行原位PCR检测,结果显示在染毒48小时的细胞片上,原位PCR法检测到的阳性率较高,具有高敏感性和组织定位的优点。与常规免疫组化方法相比,差异极显著。 此外,研究者还利用空气干燥法制备了F81/猫肾细胞的染色体标本,并进行了核型分析。结果表明,F81为亚二倍体细胞系,染色体众数为30,各代次的染色体结构畸变率为0。F81/猫肾细胞的遗传学特性相对稳定,基础细胞库和最高代次细胞中存在相同的染色体标志和核型,可作为制苗用细胞。 主要参考资料 [1] CN201710624877.1一株适应全悬浮培养的猫肾细胞系F?81S及其应用 [2] 猫肾F_(81)传代细胞中犬细小病毒原位PCR检测方法 [3] 猫肾细胞系F81传代细胞染色体遗传变异率分析 ...
大肠杆菌经过特殊处理后可以摄取外源DNA,这种状态下的细胞被称为感受态细胞。OrigamiB(DE3)菌株含有突变的还原酶基因,能够增强蛋白的可溶性和正确折叠。该菌株还能同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,适用于多种质粒的蛋白表达。OrigamiB(DE3)感受态细胞的转化效率达到了很高的水平。 操作方法 1. 将OrigamiB(DE3)感受态细胞从-80℃取出,迅速放入冰中,等待菌块融化后加入目的DNA并轻轻混匀,然后在冰上静置25分钟。 2. 将混合物置于42℃水浴中加热45秒,然后迅速放回冰上静置2分钟。 3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基,混匀后在37℃、200rpm下复苏60分钟。 4. 以5000rpm离心1分钟,留取约100μl上清液,轻轻吹打重悬菌块并涂布到含有相应抗生素的培养基上。 5. 将平板倒置放在37℃培养箱中过夜培养。 基因型 F-ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR) 注意事项 1. 最好在冰中缓慢融化感受态细胞,加入目标DNA的时间不宜超过8分钟,长时间存放会降低转化效率。 2. 混入质粒时应轻柔操作。 3. 转化高浓度的质粒时,可以减少最终涂板的菌量。 4. IPTG的浓度可以根据需要选择(0.1-2mM均可)。 5. 为了获得所需的蛋白,最佳的诱导时间、温度和IPTG浓度需要进行优化。 主要参考资料 [1] OrigamiB(DE3)感受态细胞说明书 ...
概述 氰化铜是一种黄绿色粉末,具有剧毒性和极不稳定性。它在受热时会分解成氰化亚铜并释放出氰气。氰化铜不溶于水,但可以溶解于吡啶、氢氧化钾或氰化钾溶液。它与酸反应会产生极毒的氰化氢气体。氰化铜可以通过用氢氰酸处理新沉淀的氧化铜或向硫酸铜溶液中加入氰化钾来制备,广泛应用于冶金工业、镀铜工艺和有机合成等领域。 氰化铜的结构研究进展 对于Cu(I)化合物的研究一直是化学工作者的热点。Cu(I)的配位方式多样,包括直线型的Cu(CN) 2 、三角形的Cu(CN) 3 和四面体型的Cu(CN) 4 等。由于Cu(I)的电子排布为d10结构,铜的化合物通常具有良好的荧光性。 一维Cu(CN)结构的研究进展 2006年,Abdessadek Lachgar课题组报道了一个结构新奇的链状化合物[Cu(CN) 2 (bpy)] (bpy = 2,2′-bipyridyl)。该化合物中的铜原子在不对称单元中有三种配位环境,相邻的铜通过氰根构成螺旋状的链,并通过有机配体之间的π-π作用堆积形成平面结构。 二维Cu(CN)结构 2001年,Jon Zubieta课题组报道了多个二维结构的氰化铜化合物,其中大多数化合物展现出链状结构或环状结构。这些化合物中的Cu(CN)单元构成了链状结构或环状结构,层与层之间的距离主要由Cu-Cu之间的弱作用决定。 2006年,卢忠灿课题组报道了多个Cu(I)的化合物,其中化合物[Cu 3 (CN)(trz) 2 ]n是一个有趣的双重贯穿的二维超分子结构。该化合物中的铜原子通过氰根连接形成波浪形平面,展现出较大的空洞,并通过三唑配体之间的π-π作用形成相互贯穿的二维结构。 三维Cu(CN)的研究现状 2010年,王发宇课题组报道了两个具有新颖三维结构的氰化铜化合物。这些化合物中的Cu(CN)单元构成了复杂的三维结构,其中包括多个环状单元和链状单元。 参考文献 [1]马世昌主编,化学物质辞典,陕西科学技术出版社,1999年04月第1版. [2]顾佳. 氰化铜配位聚合物的结构修饰与荧光性质研究[D].哈尔滨师范大学,2013. ...
培养基是一种人工配制的混合物质养料,用于培养微生物或生物细胞组织,主要用于微生物的分离、培养、鉴定、保藏和酿造、发酵等方面。根据生物营养需要的不同,培养基的具体成分也会有所差异,一般包含水、碳水化合物、含氨物质和矿质盐类等。根据所用原料的不同,培养基可以分为合成培养基和天然培养基。此外,根据是否加入赋形剂,培养基还可以分为固体、半固体和液体培养基。 培养基的应用领域是什么? HT培养基是一种用于杂交瘤细胞培养的培养基,其中添加了HT(HTSupplement)作为补充剂。HT是次磺嘌呤和胸腺嘧啶核苷的混合剂,用于克服细胞内残留氨基喋呤对DNA经典合成途径的抑制作用。次黄嘌呤是一种白色针状结晶,可以用作生物培养剂和生化研究。HT培养基添加剂经过照射灭菌,每个包装可配制成10ml浓缩液(50X),用于杂交瘤细胞的筛选。 主要参考资料 [1] 中国卫生管理辞典 [2] 化学物质辞典 ...
磺酰氟类化合物是一类重要的亲电试剂,在有机合成中起着重要作用。它们不仅可以与许多亲核试剂进行加成反应,还是重要的自由基氟化试剂。最近的研究表明,吡啶磺酰氟可以作为氟化试剂用于氟化脂肪醇。此外,磺酰氟类化合物还广泛应用于生物活性分子的合成,并被用作18F的标记试剂,取得了令人振奋的成果。 制备方法 一种以磺酰肼和氟试剂作为反应的起始原料的制备方法被提出。该方法具有以下优点:条件温和,可以兼容水和空气,无需催化剂,只需在溶剂中搅拌加热即可高产率地得到各种取代的磺酰氟类化合物。 具体操作如下:在一个洁净干燥的10毫升Schlenk反应管中,依次加入对硝基苯磺酰肼、1-氯甲基-4-氟-1,4-重氮化二环2.2.2辛烷双(四氟硼酸盐)和水作为反应溶剂,然后在80°C下搅拌反应18小时。反应结束后,通过加入乙酸乙酯进行萃取,然后旋干有机相。最后,使用少量的石油醚和乙酸乙酯进行溶解,并通过硅胶柱过柱分离,得到白色固体产物。产物的核磁共振谱图显示,获得的产物为对硝基苯磺酰氟。 主要参考资料 [1] CN201510613062.4 一种磺酰氟类化合物的制备方法...
ABC转运体是一组跨膜蛋白,它们在细胞膜和细胞器膜上与ATP结合,介导多种分子的转运。这些转运体对氨基酸、脂质、脂多糖、无机离子、多肽、糖类和各种药物等分子的转运起着重要的作用。它们是一类膜转运蛋白,能够调节广泛的药物、毒性药物和化学物质的转运。ABC转运体是同源膜蛋白,它们利用细胞的ATP来实现特异性活性。其中一些转运体被发现是抗药性蛋白,可以保护癌细胞免受化疗剂的影响。目前已经发现了48种ABC转运体,它们根据序列同一性和功能被分为7类。 ABC转运体在生理学中的作用 猴肝细胞ABC转运体在调节体内多种重要生理学作用方面起着关键作用,可以提供对抗有害环境化合物的防御。因此,猴肝细胞ABC转运体可能成为治疗与转运体缺陷相关的疾病、防止药物转运到靶细胞外以及调节ABC转运体活性的潜在药物靶点。近年来,研究发现一些ABC家族成员与脂质代谢有关,并参与胆固醇结石等疾病的发生和发展过程。脂质代谢是一个复杂的过程,涉及多个因素、步骤和基因。猴肝细胞ABC转运体家族成员在脂质吸收、分泌和转运等方面发挥着重要作用,并与多种脂类代谢相关疾病,包括胆固醇结石病,存在联系。 主要参考资料 [1] CN200880111472.7囊性纤维化跨膜通道调节因子的调节剂 ...
育亨宾提取物是一种有效成份为育亨宾碱的物质,它属于选择性α-2肾上腺受体拮抗剂。它的主要作用是收缩阴茎静脉,减少静脉回流,从而促使阴茎充血勃起。 育亨宾提取物的应用 CN201910306858.3提供了一种补肾壮阳的天然植物成分组合物,该组合物由多种植物提取物成分组成。 其中包括: 育亨宾提取物 9-19%; 玛卡提取物 7-17%; 淫羊藿提取物 16-26%; L-精氨酸 16-26%; 刺蒺藜提取物 9-19%; 肉苁蓉提取物 7-17%; 兔丝子提取物 2-12%。 制备该组合物的工艺步骤包括紫外线灭菌、筛选、搅拌混合、制成颗粒、干燥等。 CN201610732846.3公开了一种用于石榴种植的羊粪有机肥,该有机肥由多种原料制成,其中包括育亨宾提取物。 CN200810238113.X公开了一种有助于提高男性性功能的功能性食品,其中的有效成分包括育亨宾提取物。 CN201410198478.X提供了一种改善雄性动物生殖系统功能的药物组合物,其中的药味配方中包括育亨宾提取物。 主要参考资料 [1] CN201910306858.3 一种用于补肾壮阳的纯天然植物药组合物 [2] CN201610732846.3一种用于石榴种植的羊粪有机肥 [3] CN200810238113.X一种提高男性性功能的功能性食品 [4] CN201410198478.X一种改善雄性动物性功能障碍的药物组合物 ...
磷肥、复混肥、农药、饲料、土壤,植物中磷含量的测定方法有多种,包括磷钼酸喹啉重量法、磷钼酸喹啉容量法、钒钼酸铵光度法、钼酸铵重量法、磷钼酸铵容量法及磷钼蓝比色法等。而在我国国家标准或化工行业标准规定的磷矿、磷肥、复合肥及饲料添加剂和工业用磷酸盐中磷含量的测定方法中,一般采用磷钼酸喹啉法(重量法或容量法)及钒钼酸铵法。磷钼酸喹啉法中最重要的试剂是喹钼柠酮试剂。喹钼柠酮试剂的配制相当繁杂,一不小心就会失败或沉淀或变红、或测定含量偏低、或测定含量过高,给使用者带来很大麻烦。而且配制的质量相当重要,稍不小心就不能用,或造成测定结果失真或偏差。因此,了解喹钼柠酮试剂的制备方法和使用技术是非常重要的。 喹钼柠酮试剂的应用 喹钼柠酮主要用于检测磷含量。它在炭复合磷酸铁锂正极材料磷元素含量检测、湿法磷酸磷石膏中残磷含量测定以及有机肥料中磷的检测等方面有广泛的应用。 例如,在炭复合磷酸铁锂正极材料磷元素含量检测中,可以通过称取待测试样品,将其溶解后加入过量的喹钼柠酮溶液,经过反应、冷却、过滤等步骤,最终得到磷元素含量。这种方法能够快速、准确地检测磷元素含量。 另外,喹钼柠酮试剂还可以用于测定湿法磷酸磷石膏中残磷含量。该方法使用少量、较低浓度的盐酸代替逆王水来提取磷石膏中的残磷,具有酸种类少、用量小、对环境污染及对设备腐蚀小、节能、省时等优点。 此外,喹钼柠酮试剂还可用于有机肥料中磷的检测。通过加入喹钼柠酮试剂,经过一系列的处理步骤,可以测定有机肥料中磷的含量,而无需增添分析仪器。 主要参考资料 [1] CN201410540020.8一种喹钼柠酮试剂的制备方法 [2] CN201810007606.6一种炭复合磷酸铁锂正极材料磷元素含量检测方法 [3] CN201611086857.5一种测定湿法磷酸磷石膏中残磷含量的方法 [4] CN201410391567.6一种有机肥料中磷的检测方法 ...
肉苁蓉是一种药用植物,又称地精、大芸、金笋、寸芸。它是列当科植物肉苁蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma的带鳞片的肉质茎,主要产于内蒙古。肉苁蓉具有甘、咸、温的性质,能够补肾阳、益精血,润肠通便。它被广泛用于治疗阳痿、早泄、遗精、不孕等症状。煎服肉苁蓉的剂量为6~9克。肉苁蓉含有多种活性成分,如D-甘露醇、肉苁蓉多糖、甜菜碱、洋丁香酚苷等,这些成分能够增强内分泌和代谢功能,抗衰老,抗氧化,保肝,促进排便。此外,肉苁蓉还能增强免疫功能,对心肌缺血有一定的保护作用。研究还发现,肉苁蓉与牛血清白蛋白有相互作用,形成基态复合物,这种作用受到一些金属离子的影响。 肉苁蓉的药用价值 肉苁蓉是一种药用植物,具有补肾阳、益精血,润肠通便的作用。它被广泛用于治疗阳痿、早泄、遗精、不孕等症状。肉苁蓉含有多种活性成分,如D-甘露醇、肉苁蓉多糖、甜菜碱、洋丁香酚苷等,这些成分能够增强内分泌和代谢功能,抗衰老,抗氧化,保肝,促进排便。此外,肉苁蓉还能增强免疫功能,对心肌缺血有一定的保护作用。 肉苁蓉与牛血清白蛋白的相互作用 研究发现,肉苁蓉与牛血清白蛋白有相互作用,形成基态复合物。这种作用受到一些金属离子的影响。具体研究表明,肉苁蓉与牛血清白蛋白的结合常数为4.36×104L·mol-1,结合位点数约为1,二者之间的空间距离为3.09nm。肉苁蓉与牛血清白蛋白的相互作用主要表现为氢键作用,猝灭机制主要为静态猝灭和非辐射能量转移。此外,肉苁蓉对牛血清白蛋白的空间构型也有一定的影响。 主要参考资料 [1] 来源:中医大辞典 [2] 肉苁蓉苷F与牛血清白蛋白相互作用的光谱学研究 ...
粪甾烷-3-醇是一种用于医药合成的粪甾烷衍生物。本文将介绍制备粪甾烷-3-醇的方法。 制备过程 制备粪甾烷-3-醇的步骤如下:首先,用丙酮提取冻干的牛肉脑粉。然后将20克干燥的残留物悬浮在培养基中,该培养基由胰蛋白酶酶ept、氯化钠、钾磷酸氢二钠、巯基乙酸钠、亚甲蓝、L-胱氨酸、亚硫酸钠、琼脂和水组成。接下来,在无氧气的条件下将培养基放置几天,然后在37℃的厌氧环境中培养10天。之后,将反应混合物用石油醚萃取、水洗涤、硫酸钠干燥、过滤,并在减压下蒸发。 接下来,将油状残余物溶于乙醇中的氢氧化钾,并通过回流4小时进行水解。冷却后加入水,并用石油醚萃取溶液,然后用水洗涤以达到中性pH值。有机溶液经硫酸钠干燥,蒸发至干,再次溶于石油醚中,并在硅胶柱上进行色谱。通过逐步洗脱,用乙酸乙酯在石油醚中的浓度逐渐增加,最后得到粪甾烷-3-醇。 主要参考资料 [1] (GB1237483)MICROBIALREDUCTIONOFDelta<5>STEROIDS ...
冬凌草甲素(Ori)是一种生物活性的菊苣二萜,是冬凌草的主要活性成分,已被广泛用于中药中。最近发现冬凌草甲素具有抗炎的活性,但其潜在的机制和直接目标尚不清楚。 在炎性的发生机制中,NLRP3炎性体起着中枢的作用。NLRP3炎性体是由先天免疫传感器NLRP3,ASC和caspase-1组成的多蛋白复合物。这种复合物的组装导致caspase-1的激活,促进pro-IL-1β和pro-IL-18的裂解,从而产生成熟和功能性IL-1β和IL-18。冬凌草甲素被报道能够治疗炎性反应,但是其机理尚不清楚。 首先我们检测了冬凌草甲素能够抑制caspase-1的切割和IL-1β分泌,从而阻断NLRP3活化,并且对TNF-α的产生没有影响。之后发现冬凌草甲素不能抑制LPS诱导的前IL-1β,NLRP3表达和TNF-α产生。从而证实冬凌草甲素特异性抑制NLRP3炎性体激活。 接着,研究冬凌草甲素是如何阻断NLRP3活化。发现冬凌草甲素不影响NLRP3上游的信号传导通路,并且能够抑制尼日利亚菌素诱导的内源性NLRP3炎性体复合物形成,并发现其阻断了内源性NEK7-NLRP3和NLRP3-ASC相互作用,表明冬凌草甲素可能通过阻断NLRP3来阻止NLRP3-NEK7炎性体组装。 由于冬凌草甲素能通过阻止NLRP3-NEK7相互作用来阻止NLRP3炎性体组装,猜测冬凌草甲素可能直接靶向NLRP3或NEK7。发现LPS-BMDM的细胞裂解物与bio-Ori一起孵育时,NLRP3能够在bio-Ori pull down实验中鉴定到,而NEK7、ASC或caspase-1则没有被鉴定到。 为了进一步检验冬凌草甲素是否直接结合NLRP3,将纯化的NLRP3蛋白与bio-Ori一起孵育,并且通过bio-Ori pull down GFP-NLRP3,证实冬凌草甲素直接与NLRP3相互作用。考虑到冬凌草甲素的结构,猜测冬凌草甲素能够特异与NLRP3上的半胱氨酸形成共价的化学键,因此,构建了NLRP3突变体,将其中的九个半胱氨酸都突变成为丙氨酸,结果显示半胱氨酸279(C279A)的突变消除了NLRP3与冬凌草甲素的结合。 总之,本文显示冬凌草甲素可以靶向NLRP3以发挥其抗炎活性。并且冬凌草甲素在与Cys279共价结合时,阻断了NLRP3-NEK7相互作用和随后的NLRP3炎性体组装和活化,从而有效抑制了NLRP3相关疾病。 ...
基因敲除小鼠是通过基因敲除技术培养出的小鼠模型,常用于临床和科研实验中的动物模型。 基因敲除技术是一种新型分子生物学技术,起源于20世纪80年代,主要基于同源重组原理。它通过将标记基因定点地整合到目标细胞基因组的特定位点,实现对细胞内目的基因的敲除。 基因敲除的方法 基因敲除技术已经广泛应用于动植物、微生物,有多种方法可供选择,包括同源重组法、随机插入突变法、RNA干扰法、ZFNs法、TALEs法,以及目前热门的CRISPR/Cas9系统介导的基因敲除技术。基于同源重组的方法包括RecA系统同源重组法、Red系统同源重组法、基于自杀载体的同源重组法和基于温敏型质粒的同源重组法。 参考文献 [1] 王雪,黄建忠,李力。基因敲除技术在微生物中的应用。微生物学杂志,2019年8月,第39卷第4期。 ...
作为大部分有机体和病毒的遗传物质,脱氧核糖核酸(DNA)在生物的遗传与变异中起着重要作用。小鼠作为遗传学研究的首选实验动物,其基因组DNA的提取和分析对于识别疾病相关基因、克隆功能分析以及建立人类疾病模型具有重要意义。 小鼠基因组DNA提取的方法有哪些? 1、酚/氯仿抽提法:虽然该方法提取的DNA纯度较高且无RNA污染,但会有少许蛋白质污染,并且操作过程中会接触到有害物质酚和氯仿。 2、玻璃棒缠绕法:该方法得到的DNA片段较大,但纯度较低且有蛋白质污染,难以从玻璃棒上溶解下来。 3、常规法:常规法提取的DNA纯度较低且质量较差,不适用于高要求的实验。 4、血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒法:该方法提取得到的DNA纯度高、浓度大,且操作简单易行,具有广泛的推广价值。 小鼠基因组DNA的成品及特点是什么? 小鼠基因组DNA是从无疾病小鼠全血中分离得到的。经过脉冲电场凝胶电泳测量,90%以上的DNA大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交、基因组分析(包括PCR)和基因组文库构建等实验。它可以在低温下运输,并且在4℃保存一年有效期。 主要参考文献 [1]赵金潭,刘丽霞。小鼠基因组DNA提取方法比较研究。《现代畜牧兽医》 2019年第2期9-11,共3页。 [2]卢向阳。分子生物学。第2版[M]。北京:中国农业出版社,2011。...
蹄甲多肽及其片剂是经过山东大学、山东中医药大学、潍坊医学院等单位与山东莱阳生化制药厂联合研制的一种新药,早期被称为妇血宁。然而,现有制剂存在剂量偏大、服用不便的缺点。为了降低剂量并提高功血的疗效,需要进一步研究有效成分的纯化和结构。通过化学合成或基因工程制备多肽有效片段,可以增加有效成分的剂量。蹄甲多肽具有几乎无不良反应的优点,甚至对孕妇和哺乳期妇女也安全可用。此外,蹄甲多肽还具有多种药理活性,尤其是抗炎作用等方面有潜力开发新的剂型和临床用途。虽然猪蹄甲中也含有糖类成分,但将蹄甲多肽归类为糖类生化产品还需要进一步讨论。因此,在介绍生产工艺和质量标准时,应使用蹄甲多肽这个名称,而不是过去的妇血宁。 蹄甲多肽的药理作用 1. 对子宫的影响 蹄甲多肽可以兴奋子宫,增加子宫收缩的频率和幅度,改善功血的子宫内膜血管血流障碍。 2. 对内分泌的影响 蹄甲多肽可以调节内分泌,促进肾上腺分泌糖皮质激素,抑制纤溶,减少血管通透性,稳定溶酶体膜,从而改善或制止功血的出血。 3. 有效成分 蹄甲多肽是蛋白质、多肽和氨基酸的混合物,其中主要有效成分为多肽。通过SephadexG-100色谱分离蹄甲多肽的水溶部分,可以得到F1、F2和F3三个组分。紫外线扫描结果表明,这三个组分都是多肽或蛋白质。F1的相对分子质量较大,药理作用较弱。F2具有显著的促凝血和抗炎作用,且有抑制子宫收缩的倾向。F3具有显著的兴奋子宫作用,促凝血和抗炎作用也较强。F2和F3都含有多种分子大小相近但电荷不同的多肽。 蹄甲多肽的处方应用 蹄甲多肽可用于功能性子宫出血、月经过多等疾病。它具有兴奋子宫、调节内分泌、促凝血、促血小板凝集和抗炎作用。建议口服,每次3~5片,每天三次,或按医嘱服用。 蹄甲多肽的制备方法 1)原料处理:取健康猪的蹄甲,除去杂物,用清水冲洗后浸泡。调节pH值至5~6,静置过夜。然后将浸泡液弃去,再用清水冲洗至中性,最后用去离子水洗净。将蹄甲烘干并粉碎成粗粒。 2)碱性提取:将猪蹄甲粗粒放入耐碱容器中,加入15倍量的自来水,用浓氢氧化钠调节pH值为9~12,煮沸提取24小时。在提取过程中,需要随时加入氢氧化钠以维持pH值在12左右。将药液过滤。滤渣再加入10倍量的自来水,煮沸提取约6小时,再次过滤药液。将两次提取的药液合并。也可以在适当的加压条件下加热,使提取温度更高。 3)浓缩、干燥和粉碎:将提取液冷却后,用盐酸调节pH值为7.5~8.0,静置约0.5小时,然后过滤。滤渣可以作为下次提取的原料。将滤液减压或常压浓缩至稠膏状,放入搪瓷盘中,厚度不超过5mm,进行真空干燥约2小时。干燥过程中逐渐升温至80℃左右。及时进行粉碎和包装,密封保存在干燥处。产品应符合蹄甲多肽国家药品标准的规定。 主要参考资料 [1] 蹄甲多肽的研究概况与展望 [2] 蹄甲多肽药理学研究进展 [3] 临床处方药物手册 ...
背景 [1-3] 大鼠游离前列腺特异性抗原(FPSA)ELISA试剂盒是一种采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附(ELISA)的检测试剂盒。 该试剂盒将大鼠游离前列腺特异性抗原(FPSA)捕获抗体包被在微孔中,然后依次加入标本、标准品和HRP标记的检测抗体。经过温育和洗涤后,使用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的大鼠游离前列腺特异性抗原(FPSA)呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),可以计算出大鼠游离前列腺特异性抗原(FPSA)的样品浓度。前列腺特异抗原(prostate specific antigen,PSA)是由前列腺上皮细胞分泌产生,属于激肽酶家族蛋白,存在于前列腺组织和精液中,正常人血清中含量极微。前列腺特异抗原在血清中主要以三种形式存在:①游离前列腺特异抗原(fPSA),占总前列腺特异抗原(tPSA)的10%~30%;②前列腺特异抗原与α1-抗糜蛋白酶结合形成的复合物(PSA-ACT);③前列腺特异抗原与α2-巨球蛋白酶结合形成的复合物(PSA-α2M)。后两者又称复合前列腺特异抗原(cPSA)。前列腺特异抗原的主要生理功能是可防止精液凝固,具有极高的组织器官特异性,是目前诊断前列腺癌的首选标志物。 应用 [4][5] fPSA/tPSA、PSAD、SF对tPSA灰区前列腺癌的诊断价值研究 本研究旨在探究游离型前列腺抗原占总前列腺抗原比例(fPSA/tPSA)、前列腺特异性抗原密度(PSAD)、血清铁蛋白(SF)单独检测或联合检测对总前列腺特异性抗原(tPSA)处于灰区的前列腺癌患者的临床诊断价值。研究选取了30例前列腺增生组(BPH)和30例前列腺癌组(PCa)作为研究对象,记录了各组患者的年龄、前列腺癌组的Gleason评分,并检测了各组患者的血清tPSA、fPSA和SF。通过B超测定前列腺体积,计算出PSAD和fPSA/tPSA。采用统计学方法分析fPSA/tPSA、PSAD和SF单独或联合检测对前列腺癌的诊断效能。 结果显示:1.两组患者的年龄无统计学差异,前列腺增生组的前列腺体积明显高于癌症组,前列腺癌组的血清铁蛋白与Gleason评分呈相关性,高Gleason评分组的血清铁蛋白水平明显高于低评分组。2.总PSA在两组之间无显著性差异,但其余三个指标均有显著性差异。ROC曲线分析显示,fPSA/tPSA、血清铁蛋白和PSAD的曲线下面积分别为0.651、0.673和0.759,其中PSAD的诊断效能最好,诊断灵敏度和特异度分别为53.3%和90%。联合三个指标后重新进行ROC曲线分析,显示其曲线下面积为0.830,诊断效能高于各指标单独检测,诊断灵敏度和特异度分别为83.3%和63.3%。结论:1.联合检测fPSA/tPSA、PSAD和SF在tPSA灰区前列腺癌的诊断效能高于各个指标单独检测。2.血清铁蛋白可作为预测前列腺癌恶性程度的指标。 参考文献 [1]Silencing of lncRNA MALAT1 inhibits cell cycle progression via androgen receptor signaling in prostate cancer cells[J].Xiaofan Dai,Lingyun Liu,Zuowen Liang,Kaimin Guo,Shengqi Xu,Hongliang Wang.Pathology-Research and Practice.2019 [2]Post‐treatment urinary sarcosine as a predictor of recurrent relapses in patients with prostate cancer[J].Jaromir Gumulec,Martina Raudenska,Dalibor Pacik,Mariana Plevova,Alena Sorokac‐Kubolkova,Zuzana Lackova,Natalia Cernei,Vladislav Strmiska,Ondrej Zitka,Zbynek Heger,Vojtech Adam.Cancer Medicine.2018(11) [3]Racial variation in the utility of urinary biomarkers,PCA3 and T2ERG,in a large,multicenter study[J].Padraic G.O’Malley,Daniel P.Nguyen,Bashir Al Hussein Al Awamlh,Guojiao Wu,Ian M.Thompson,Martin Sanda,Mark Rubin,John T.Wei,Richard Lee,Paul Christos,Chris Barbieri,Douglas D.Scherr.The Journal of Urology.2017 [4]Clinical utility of a novel urine-based gene fusion TTTY15-USP9Y in predicting prostate biopsy outcome[J].Yasheng Zhu,Shancheng Ren,Taile Jing,Xiaobing Cai,Yawei Liu,Fubo Wang,Wei Zhang,Xiaolei Shi,Rui Chen,Jian Shen,Ji Lu,Chuanliang Xu,Huiqing Wang,Haifeng Wang,Yang Wang,Bing Liu,Yaoming Li,Ziyu Fang,Fei Guo,Meng Qiao,Dan Shen,Xin Lu,Xu Gao,Jianguo Hou,Yinghao Sun.Urologic Oncology:Seminars and Original Investig.2015(9) [5]赵朋.fPSA/tPSA、PSAD、SF对tPSA灰区前列腺癌的诊断价值[D].河北医科大学,2019. ...
硫酸铝是通过铝土矿和硫酸加压反应制得的,或者通过硫酸分解明矾石、高岭土和含氧化铝硅原料制得的。硫酸法将铝土矿粉碎至一定粒度,加入反应釜与硫酸反应,反应液经沉降,澄清液加入硫酸中和至中性或微碱性,然后浓缩至115℃左右,经冷却固化,粉碎制得成品。化学反应方程式:Al2O3+3H2SO4→Al2(SO4)3+3H2O 硫酸铝在工业中有广泛的应用: 1、在水处理中,硫酸铝可用作絮凝剂,能够将水中的细小微粒和自然胶粒凝聚成大块絮状物,用于饮用水处理可以控制水的颜色和味道。 2、在造纸工业中,硫酸铝可用作纸张施胶剂,增强纸张的抗水防渗性能,起到增白、施胶、助留、助滤等作用。推荐使用无铁硫酸铝,对白纸的色度不会产生不良影响。 3、在印染工业中,硫酸铝溶解于中性或微碱性的水体时,会产生胶体沉淀氢氧化铝,用于印染布料时,氢氧化铝胶体使得染料更容易附着于植物纤维上。 4、在水泥行业中,硫酸铝主要用作水泥增强剂,制作水泥增强剂时硫酸铝的用量比例是40-70%。 5、在消防工业中,硫酸铝与小苏打、发泡剂组成泡沫灭火剂。 6、在采矿工业中,硫酸铝用作选矿剂,用于提取金属矿物。 7、在制革工业中,硫酸铝用作鞣剂,能够与皮革中的蛋白质结合,使皮革柔软、耐磨,并增加其抗菌性能和防水性能。 8、在化妆品中,硫酸铝用作抑汗化妆品原料(收敛剂)。 9、在杂料工业中,硫酸铝用作沉淀剂,用于生产铬黄和色淀染料,同时起到固色和填充剂的作用。 10、硫酸铝可以作为原料,用于制造人造宝石和高级铵明矾以及其他铝酸盐。 11、在电镀工业中,硫酸铝可作为电镀液的成分,用于镀铝和镀铜等。 12、硫酸铝具有很强的酸性,可以在木材表面形成酸液,从而有效地抑制木材中的真菌、霉菌等微生物的生长,达到防腐的目的。 13、硫酸铝可以用作催化剂,用于一些化学反应。例如,在石油炼制过程中,它可用于催化裂化反应,将重质石油分子转化为轻质产品。此外,硫酸铝还可以用于其他催化反应,如脱水反应和酯化反应。 14、硫酸铝可用作动物胶的有效交联剂,并能提高动物胶的黏度。 15、硫酸铝可用作脲醛胶黏剂的固化剂,20%水溶液固化速度较快。 16、硫酸铝可用于园艺调色,添加到肥料中可以使植物花朵变蓝。 17、硫酸铝可用作油脂工业的澄清剂。 18、硫酸铝可用作石油工业的除臭脱色剂。 19、硫酸铝可以与表面活性剂共同作用,提高液体中颗粒的悬浮性,减小颗粒的聚集作用,从而有效防止颗粒沉淀,增加液体的稳定性。 20、硫酸铝还可以调节土壤的pH值,因为它水解生成氢氧化铝的同时产生少量的硫酸稀溶液,可以促进粘性土的结构改良,提高土壤的透气性和排水性。 ...
 
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