小鼠化氢酶(CAT)elisa试剂盒
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测 定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应 而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行 定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
   然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。
操作步骤: 
1. 准备试剂:ELISA 试剂盒中包含以下组分:已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)、酶标记的抗原或抗体(结合物)、酶的底物、阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)、参考标准品和控制血清(定量测定中)、结合物及标本的稀释液、洗涤液和酶反应终止液。
2. 包被:用包被缓冲液将抗原或抗体稀释至适当浓度,然后在每个聚苯板的反应孔中加入 0.1ml,4℃过夜。
3. 洗涤:弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液清洗反应孔,重复 3 次,每次 3 分钟。
4. 加样:将待检样品和阴性对照品、阳性对照品按一定稀释度加入已包被的反应孔中,37℃孵育 1 小时。
5. 洗涤:再次清洗反应孔。
6. 加酶标记物:将酶标记的抗原或抗体加入反应孔中,37℃孵育 1 小时。
7. 洗涤:清洗反应孔。
8. 加底物:每个反应孔中加入适量的酶底物,37℃孵育 10-30 分钟。
9. 终止反应:加入终止液,终止酶促反应。
10. 读数:用酶标仪检测各反应孔的吸光度值,根据标准曲线计算待测样品的浓度。
通过上述步骤,可以实现对特定抗原或抗体的高灵敏度检测。 
小鼠化氢酶(CAT)elisa试剂盒操作注意事项:
1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 
小鼠化氢酶(CAT)elisa试剂盒性能
1. 灵敏度:的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。 
常见祥本处理方法
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固1020分钟,2 -8C条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10 20分钟后,2-8C条件离心20分钟左右(2000 3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2 8C条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7. 2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000 3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨:
5、其他样本处理方法:请联系客服索要
温馨提醒
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